01 文章背景簡介  

酒精性肝病（alcoholic liver disease，ALD）是由于長期大量飲酒導致的肝臟疾病。初期通常表現為脂肪肝，進而可發展成酒精性肝炎、肝纖維化、肝硬化甚至肝癌。其主要臨床特征是惡心、嘔吐、黃疸、可有肝臟腫大和壓痛。并可并發肝功能衰竭和上消化道出血等。嚴重酗酒時可誘發廣泛肝細胞壞死，甚至肝功能衰竭。酒精性肝病是我國常見的肝臟疾病之一，是肝硬化和肝臟相關死亡的主要因素，嚴重危害人民健康。

目前，還沒有太好的治療方法可以阻止酗酒者酒精性病變向肝硬化發展，治療酒精性肝病主要依靠戒酒。越來越多的證據表明免疫系統在酒精性肝病的病理過程中發揮了重要作用。在酒精刺激下，先天性和適應性免疫反應被激活，表現為巨噬細胞、中性粒細胞、B細胞和T細胞的浸潤，并誘導促炎細胞因子導致肝臟炎癥。抑制炎癥細胞浸潤可以減輕肝臟炎癥，從而阻止酒精性肝病的發展。

髓源性抑制細胞（MDSC）由各種未成熟的髓系細胞組成，是免疫抑制網絡的主要組成部分。根據Ly6G和Ly6C的相對表達水平，其在嚙齒動物中被人為地分為粒細胞抑制細胞（G－MDSC）和單細胞抑制細胞（M－MDSC）。G－MDSC（CD11b＋Ly6G＋）和M－MDSC（CD11b＋Ly6G－Ly6Chigh）表現出不同的形態，并通過各種途徑發揮免疫抑制能力。幾十年前，M－MDSC和G－MDSC都被認為是通過抑制T細胞來幫助癌細胞逃避免疫監視，但直到最近，它們在免疫系統中的重要性才被更多人重視。

MDSC會在大多數炎癥情況下擴增和積累，在不同環境下產生各種促炎和抗炎細胞因子。M－MDSC和G－MDSC亞群在非癌癥相關疾病中的作用由特定的炎癥和時機決定。目前對CD11b＋Ly6G＋群的分類仍有爭議，因為G－MDSC和中性粒細胞在細胞表面都有CD11b和Ly6G的表達。由于在形態、表型和功能上的相似性，在研究它們在炎癥性疾病中的作用時產生混淆。一般來說，具有抑制T細胞活性的CD11b＋Ly6G＋細胞被認為是G－MDSC，但一些具有免疫抑制作用的中性粒細胞也可能包括在內。G－MDSC可能是具有免疫抑制功能的中性粒細胞的新表型。因此，這種具有CD11b＋Ly6GhighLy6Cint表達的具有抑制T細胞作用的中性粒細胞，記為G－MDSC樣細胞。研究表明，G－MDSC樣細胞群在應對急性酒精攝入時表現出保護作用，但其在慢性酒精性肝病中的作用機制并不清楚。

黃連素是一種從中藥材黃連中提取的生物堿，又叫做小檗堿，具有悠久的使用歷史。黃連素已被廣泛用作保肝藥物，其中大多數研究集中在CCl4等毒素引起的肝癌、脂肪肝和肝臟纖維化。在動物研究中，已有研究證明黃連素對酗酒引起的肝損傷具有治療作用。但黃連素對急性－慢性飲酒引起的肝臟損傷的治療效果尚不清楚。急性－慢性酒精攝入的模型能較好地模擬酒精性肝病患者的飲酒模式。

2020年，香港大學李嘉誠醫學院中醫藥學院的Sha Li等人，在《Clinical and Translational Medicine》雜志（IF2020＝11．492，醫學一區）發表了題為“Modulation of gut microbiota mediates berberine－induced expansion of immuno－suppressive cells to against alcoholic liver disease”的文章。本研究建立了一個酒精喂養動物模型以模擬酒精性肝病患者飲酒模式。鑒于G－MDSC樣細胞群在對抗炎癥中的關鍵作用，推測黃連素可能介導與G－MDSC樣細胞群相關的酒精性肝病。本研究系統研究了G－MDSC樣細胞和相關的免疫細胞的參與及其分布。越來越多的證據表明，在飲酒后，腸道菌群組成發生了變化，進一步影響了腸道通透性并導致損傷。通過藥物調節腸道微生物組成可能是治療酒精性肝病的希望。由于黃連素被認為是腸道菌群的有效調節劑，因此本文也研究了腸道細菌變化對G－MDSC樣細胞的調節作用。

02 所用到的主要方法

（1）動物實驗

（2）體外細胞實驗

（3）流式細胞術

（4）實時定量PCR

（5）高通量測序

（6）Western blot

03 文章主要內容摘要

黃連素是一種從許多中草藥中提取的異喹啉生物堿化合物，已被廣泛用于改善肝功能，但其對酒精性肝病（ALD）的保肝作用機制尚不清楚。為了從腸道微生物－免疫系統軸角度探究黃連素對治療酒精性肝病的潛在機制，本文建立了一個模擬酒精性肝病患者飲酒模式的酒精喂養動物模型，通過生化試驗和組織學檢查評估肝功能，用流式細胞儀檢測免疫細胞，收集糞便樣本進行16S rRNA基因擴增測序。本文首次報道了黃連素對急性－慢性酒精性肝損傷有良好的改善作用，并探討了其與腸道微生物－免疫系統軸的相關機制。黃連素激活了小鼠肝臟中具有免疫抑制功能的細胞群體，即粒細胞樣髓源性抑制細胞（G－MDSC）樣群，從而減輕了酒精引起的肝臟損傷。黃連素可顯著增加血液和肝臟中G－MDSC樣細胞的數量，并相應地減少了細胞毒性T細胞。抑制G－MDSC樣細胞的數量可顯著減弱黃連素對抗酒精的保護作用。在體外培養的G－MDSCs樣細胞群中，黃連素激活了IL6／STAT3信號，而抑制STAT3的活性則減弱了黃連素對該細胞群的激活作用。此外，黃連素改變了整個腸道微生物群落，主要是增加了嗜黏蛋白阿克曼氏菌的豐度。腸道微生物群的減少消除了黃連素對G－MDSC樣群的誘導作用，并削弱了其對小鼠抗酒精的保肝作用，這表明腸道菌群可能參與介導這種保護群體的擴增。本文深入研究了免疫抑制反應在酒精性肝病中的作用，并有助于理解黃連素的藥理作用和作用機制。

       原文標題 : 黃連素的酒精性肝病治療作用與誘導免疫抑制細胞及調節腸道微生態有關