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液相色譜在操作過程中需注意哪些

發布日期:2022-05-29 點擊率:58

  液相色譜儀根據固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、信號記錄系統等部分組成。與經典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點。

  液相色譜儀操作步驟:

  1. 首先對流動相進行過濾,根據需要選擇不同的濾膜,一般為有機系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。

  2. 對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。

  3. 正常情況下,儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘,然后再進入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑,則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘,直至色譜柱中有機相沖凈為止) 。

  4. 一般情況下,流動相沖洗20-30分鐘后,儀器方可穩定,重要的是儀器基線走后,方可進樣測試。

  5. 同時進兩針標樣,將其結果相比較,其結果的比值在0.98-1.02之間后,就可以正式進行樣品的測試了。

  6. 樣品測試結束后,就要進行色譜儀及色譜柱的清洗和維護。如流動相為緩沖試劑,同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘,方可用有機相進行保護,否則,有損色譜柱。

  7). 關機時,先關計算機,再關液相色譜。

  液相色譜注意事項:

  1. 流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。

  2. 柱子是非常脆弱的,次做的方法,先不要讓液體過柱子。

  3. 所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。

  4. 壓力不能太大,不要超過150kgf/cm2 .

  5. 因為緩沖試劑遇有機溶劑,會結晶,有損色譜柱,所以,每次由有機相變流動相或流動相變有機相均需用蒸餾水清洗。

標簽: 液相色譜

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