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科普知識
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分光光度計

紫外可見分光光度計使用說明

發布日期:2022-10-09 點擊率:66

紫外可見分光光度計.jpg" alt="紫外可見分光光度計.jpg" src="https://file3.hi1718.com/newsfile/2017/09/12/20170912155828165.jpg">

 

    紫外可見分光光度計來自于美國,產品包含光源,單色器,吸收池,檢測器和顯 示器等,它是一款對物質進行定性,定量以及結構分析的儀器。這款儀器和人們常 用的可見光光度計有有很大的區別,除了波長范圍,使用光源都不一樣等,價格也 是后者要要貴一些;平時的使用和注意事項不一樣的,今天就先來學習一下紫外可見分光光度計使用方法:
    1.試驗中所用的量瓶、移液管均應經檢定校正、洗凈后使用。
    2.使用的石英吸收池必須潔凈。用于盛裝樣品、參比及空內溶液的吸收池,當裝 入同一溶劑時,在規定波長測定吸收池的透光率,如透光率相差在0.3%以下者可配 對使用,否則必須加以校正。
    3.取吸收池時,手指拿毛玻璃面的兩側。裝盛樣品溶液以池休積的4/5為度,使用 揮發性溶液吋應加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應無殘留溶劑。 為防止溶劑揮發后溶質殘留在池子的透光面,可先用蘸有空白溶劑的擦鏡紙擦拭, 然后再用干擦鏡紙拭凈。吸收池放入樣品室時應注意每次放入方向相同。使用后用 洗液及水沖洗干凈,晾干防塵保存,吸收池發現污染不易洗凈時可用硫酸發煙硝酸(3 :1V/V)混合液稍加浸泡后,洗凈備用。如用重鉻酸鉀清潔液清洗時,吸收池不貧在 清潔液中長時間浸泡,否則清潔液中的重鉻酸鉀結晶會損壞吸收池的光學表面,并 應充分甩水沖洗,以防重鉻酸鉀吸附于吸收池表面。
    4.測定前應先檢查所用的溶劑在測定供試品所用的波長附近是否符合要求,可用 lcm石英吸收池盛溶劑以空氣為空白(即參比光路中不放置任何物質)測定其吸收度 ,應符合規定。
    5.稱量應按藥典規定要求。配制測定溶液時稀釋轉移次數應盡可能少,轉移稀釋 時所取容積一般應不少于5cm。含量測定供試品應稱取2份,如為對照品比較法,對 照品一般也應稱取2份。吸收系數檢查也應稱取供試品2份,平行操作,每份結果對 平均值的偏差應在±0.5%以內。作鑒別或檢查可取樣品1份。
    6.供試品測定溶液的濃度,除各該品種項下已有注明者外,供試品溶液的吸收度 以在0.3~0.7之間為宜,吸收度讀數在此范圍誤差較小,并應結合所用儀器吸收度線 性范圍,配制合適的讀數濃度。
    7.選用儀器的狹縫譜帶寬度應小于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值 會偏低,狹縫寬度的選擇應以減小狹縫寬度吋供試品的吸收度不揮增加為準,對于 紫外測定的部分品種,可以使用2nm縫寬,但對某些品種如青霉素鉀及鈉的吸收度 檢查則需用lnm縫寬或更窄,否則其264nm的吸收度會偏低。
    8.測定時除另有規定者外,應在規定的吸收峰±2nm處,再測幾點的吸收度,以核 對供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度的波長作為測定波長,除另有規 定外吸收度波長應在該品種項下規定的波長±lnm以內,否則應考慮試樣的同一 性、純度以及儀器波長的準確度
    9.除另有規定外,比色法所用的空內系指用同休積的溶劑代替對照品或供試品溶 液,然后依次加入等量的相應試劑,并用同樣方法處理。
    10.當吸收度和濃度關系不呈線性關系時,應取數份梯度量的對照濃度,用溶劑補 充至同一休積,顯色后測定各份溶液的吸收度,然后以吸收度與相應的濃度繪制標 準曲線,再根據供試品的吸收度在標準曲線上求出其含量。

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