發布日期：2022-04-17 點擊率：64
細胞株若受到細菌、真菌、支原體、或是特定病毒等之污染時，會嚴重的影響實驗的結果。而細菌、真菌等之微生物污染時，較易自培養基等的外觀變化察覺。但是若受到支原體之污染時，細胞之外觀較無明顯變化，但是其污染會造成細胞之生長速率緩慢、細胞產生病變之型態改變等等變化。
各國細胞庫支原體污染的統計表，如下：
國家 受支原體污染(%) 報告年度
USA－FDA 15 1993(past 30 years)
USA－ATCC 15-20 1992
Japan－(IFO，RIKEN，JCR 80~30~22 1981 1987-19931998
Germany－DSM 36 1990-1994
Argentina 65 1987
Israel 32 1986-1993
China 95 1990
造成支原體高污染率的原因為：
1.支原體size 0.1~0.8 um，無細胞壁，可透過一般過濾膜（0.22-0.45 um）
2.支原體污染時，沒有明顯的肉眼或一般光學顯微鏡可觀察到的特征變化
3.過去缺乏簡單、快速且可靠的檢測方式
4.細胞流通間缺乏品管，造成實驗室間的相互污染
5.研究或操作人員忽略污染問題
而支原體污染了來源:
1.已受污染的細胞
2.操作人員的疏失
3.已受污染的培養基、血清
4.操作環境不良、實驗器具不潔等
由于支原體為人體口腔中之正常菌叢，實驗室之操作人員的污染亦可能為污染源，須十分注意。而萬一細胞已受支原體污染時，最佳的處理原則為將細胞高壓滅菌后丟棄，以免污染其它潔凈的細胞株。但是若是堅持要作去除支原體污染，有以下幾種方法，只不過結果會與原始的細胞特性有差異。
去除支原體污染：
1. 抗生素處理：BM-cyclin（Roche），MRA（mycoplasma removal agent，ICN），Ciprofloxcin（Bayer），Enrofloxacin（Bayer）
2. Nucleic acid metabolites：5-bromouracil，Hoechst 33258，bromodeoxyuridine
3. Anti-sera
預防與控制方面可從以下各點加強注意：
G 設備方面：
1.使用已作支原體測試ok之細胞株
2.于另一隔離之區域操作未知是否有支原體污染之細胞
3.使用不添加抗生素的培養基培養細胞
G 檢測方面：定期以標準的支原體檢測方法檢測細胞、培養基、血清、ddH2O有否被支原體污染。
G 實驗操作人員之無菌觀念與無菌操作技術之要求
有關支原體污染之問題與回答：
o 應如何避免細胞污染？
細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和支原體。 主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環境不佳、污染之血清和污染之細胞等。 嚴格之無菌操作技術、清潔的環境、與品質良好之細胞來源和培養基配制是減低污染之/最好方法。
o 如果細胞發生微生物污染時， 應如何處理？
直接滅菌后丟棄之。
下一篇： PLC、DCS、FCS三大控
上一篇： 羅克韋爾AB行程開關工
